多年以前，對(duì)于多肽合成來(lái)說(shuō)，只有聚苯乙烯的樹脂類型可供選擇，所以不用考慮選擇具體哪一種樹脂。而如今，多肽合成樹脂的種類已經(jīng)非常豐富，從碳端功能化樹脂（RinkvsWang）到前期合成的聚合物樹脂，科學(xué)家們有了越來(lái)越廣泛的多肽樹脂選擇。

所有的樹脂都有一個(gè)共同點(diǎn)，就是活性位點(diǎn)的負(fù)載比例。這一點(diǎn)在多肽合成中非常重要，本文，我們將此類合成的相關(guān)經(jīng)驗(yàn)分享給大家，我們可以一起來(lái)看看，樹脂活性位點(diǎn)的負(fù)載量是如何影響多肽的合成的。

對(duì)于高負(fù)載量的合成樹脂而言，我們可以想到很多高負(fù)載的優(yōu)點(diǎn)，很多人認(rèn)為最大的亮點(diǎn)莫過(guò)于它可以使得大規(guī)模多肽合成更加容易實(shí)現(xiàn)。可是事實(shí)真是如此嗎？高負(fù)載和低負(fù)載，哪種樹脂得到產(chǎn)物的純度更高呢？

我們認(rèn)為樹脂負(fù)載量一直是多肽合成條件優(yōu)化過(guò)程中，非常值得摸索的一環(huán)。我們一直都是使用的低負(fù)載類樹脂，這和很多人的看法并不一致，所以此次，我們將做一次對(duì)比實(shí)驗(yàn)，看看兩種樹脂的效果。

我們將一個(gè)名為18A的雙性多肽分子作為我們的合成研究對(duì)象，此分子含有18個(gè)氨基酸， 同時(shí)具有一定的旋轉(zhuǎn)構(gòu)象。我們認(rèn)為，低負(fù)載量樹脂可以有效的防止肽鏈增長(zhǎng)之后，肽鏈之間的交聯(lián)副反應(yīng)，因此，肽鍵越長(zhǎng)，低負(fù)載樹脂的效果將會(huì)越明顯。

在Biotage®Initiator+Alstra™全自動(dòng)微波多肽合成儀的幫助下，使用0.7mmol/g負(fù)載量的Fmoc-Gly-Wang聚苯乙烯樹脂，在DIC/oxyma的活化條件下，進(jìn)行酰胺偶聯(lián)，同時(shí)室溫下進(jìn)行雙Fmoc脫保護(hù)，然而我們認(rèn)為0.7mmol/g的負(fù)載量相對(duì)而言比較高，同時(shí)成本也會(huì)相對(duì)較高，或許負(fù)載 量更低一些的樹脂會(huì)更合適，同時(shí)成本也可以降低。

結(jié)果顯示，0.7mmol/g負(fù)載量的條件下，我們將反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行HPLC分析，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)物的純度是在67%，這個(gè)純度值并不令人滿意。

因此我們對(duì)反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化，將負(fù)載量降至0.33mmol/g，重新進(jìn)行了合成以及檢測(cè)，意外的情況發(fā)生了！產(chǎn)物的粗純度直接提高到了89%左右。和之前的結(jié)果相比，有了明顯的改進(jìn)。不僅提高了產(chǎn)物純度，同時(shí)反應(yīng)成本也得到調(diào)整，減少了純化步驟。

每一步的多肽合成，我們都希望足夠簡(jiǎn)單，足夠快速，在Biotage®Initiator+Alstra™全自動(dòng)微波多肽合成儀的幫助下，多肽的合成會(huì)更加簡(jiǎn)單，快速。

同時(shí)從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，樹脂負(fù)載量的增多會(huì)對(duì)多肽粗產(chǎn)物的純度產(chǎn)生顯著的影響，從而需要更多時(shí)間，精力以及資源用于純化上面。而且這種交聯(lián)效應(yīng)會(huì)隨著肽鏈的增加而加劇。因此，如果您將要合成中鏈或者長(zhǎng)鏈肽，我們建議您使用低負(fù)載樹脂。