對于多肽的固相合成而言，固相樹脂在成分和官能團(tuán)的差異化往往會導(dǎo)致合成的結(jié)果千差萬別，上一節(jié)，我們已經(jīng)討論了樹脂載樣量對于多肽合成的影響。今天我們將要討論數(shù)值的親水性以及溶脹現(xiàn)象對多肽合成帶來的影響。

多肽合成中，我們需要知道，隨著肽鏈的延長，體系內(nèi)聚合的概率會明顯增大，使得長鏈肽的合成越來越難。其中一個(gè)去提高產(chǎn)率的方法就是去使用低負(fù)載量的樹脂（見第一部分），還有另外一種方法就是選擇一種具有較高溶脹能力和親水性的樹脂，比如ChemMatrix®聚乙二醇樹脂，目前這類樹脂得到了業(yè)界非常大的關(guān)注。

Figure1：兩種樹脂的比較A) ChemMatrix®聚乙二醇樹脂；B)常見的聚苯乙烯樹脂；C)固相合成中，不同溶劑條件下，溶脹能力的比較。

為了能夠更充分的了解和探討樹脂之間的差異化，我們翻閱了Garcia-Ramos教授在JournalofPeptideScience發(fā)表的名為ChemMatrix®forcomplexpeptidesand combinatorialchemistry這篇文章，Garcia-Ramos教授合成了具有28個(gè)氨基酸的長鏈肽Thermolysinα1，由于此多肽非常容易分子內(nèi)聚合，使得合成難度大大增加，雖然Garcia-Ramos教授是手動一步步將Thermolysinα1得到，但是我們希望通過Biotage®Initiator+Alstra™全自動微波多肽合成儀將其進(jìn)行自動化合成。

首先，我們使用聚苯乙烯樹脂（0.6mmol/gRink氨基）來進(jìn)行Thermolysin多肽的合成，和之前我們的建議相比，0.6mmo/g的數(shù)值是偏高的，之所以選擇這個(gè)載樣量，是為了和下面使用的ChemMatrix樹脂做對比。

在DIC/Oxyma的活化條件下，單模加熱到75℃, 反應(yīng)5分鐘，F(xiàn)igure2.

Figure2:合成得到的Thermolysin多肽的粗產(chǎn)物分析

乍一看粗產(chǎn)物的紫外吸收譜圖，以為是拿到了反應(yīng)產(chǎn)物，但當(dāng)我們進(jìn)一步用質(zhì)譜進(jìn)一步證實(shí)之后發(fā)現(xiàn)，最大豐度的離子峰和112Da相關(guān)，它比目標(biāo)化合物更輕，疑似是丟失Ile片段所致，F(xiàn)igure3.

在得到了這些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)之后，我們重復(fù)了之前的實(shí)驗(yàn)，還是之前的方法和實(shí)驗(yàn)條件，只是我們將樹脂改成了具有更好的溶脹以及親水性能的ChemMatrix樹脂，實(shí)驗(yàn)起始幾步的檢測結(jié)果讓我們有點(diǎn)擔(dān)心效果也會有影響，但是之后的整體的情況會好得多，主峰和目標(biāo)肽幾乎用著相同的保留時(shí)間，F(xiàn)igure4。

之后，我們對主峰做了進(jìn)一步的質(zhì)譜檢測，發(fā)現(xiàn)其質(zhì)荷比完全符合目標(biāo)多肽的描述（Figure5），同時(shí)我們粗略計(jì)算了一下其純度，大概在65%左右（這很有可能是由于體系中還殘留有保護(hù)基團(tuán)）。

這一結(jié)果令人振奮！仔細(xì)分析這兩個(gè)不同類型樹脂的對比實(shí)驗(yàn)，我們可以發(fā)現(xiàn)ChemMatrix樹脂的溶脹程度比聚苯乙烯大得多，這使得官能團(tuán)在空間上彼此遠(yuǎn)離，從而減少了在肽鏈生長時(shí)發(fā)生共聚的可能性。另外一方面就是樹脂本身的親水性了，由于聚苯乙烯樹脂強(qiáng)烈的疏水性使得多肽和樹脂更多的作用而減少了溶劑中的鏈增長；而對于聚乙二醇樹脂來說，其表面具有極性醚鍵，更好的親水性，它會排斥肽鏈，從而提高合成成功的可能性。

以上實(shí)驗(yàn)，可以發(fā)現(xiàn)，在合成多肽的過程中，樹脂種類的選擇至關(guān)重要。在進(jìn)行多肽合成的條件優(yōu)化的時(shí)候，往往我們可以很簡單地通過改變樹脂的種類來進(jìn)行條件優(yōu)化，反而會更容易得到長鏈肽。這也是我們在合成多肽時(shí)候的一個(gè)非常好的優(yōu)化思路。

未來，我們將會持續(xù)使用ChemMatrix樹脂或者其他聚乙二醇類樹脂， 因?yàn)樗�具有更好的溶脹和親水性。